إي د. Mytsa ، L.Yu. كوكيفا ، س. إيلانسكي
اوميسيت فيتوفثورا إنفستانس (مونت) دي باري يسبب مرض اللفحة المتأخرة ، وهو مرض خطير يصيب البطاطس والطماطم. أحد المصادر الرئيسية للقاح الأولي P. infestans هي هياكل تكاثرية سميكة الجدران - أبواغ.
تساهم الأبواغ الهجينة التي تشكلت نتيجة عبور سلالات الوالدين المختلفة وراثيًا في زيادة التنوع الوراثي في السكان ، ونتيجة لذلك يتم تسريع عملية تكيف السلالات مع الأنواع الجديدة ومبيدات الفطريات المطبقة.
تشكيل Oospore P. infestans في هذا المجال لوحظ في العديد من دول العالم: روسيا (سميرنوف وآخرون ، 1999) ، النرويج (هيرمانسن وآخرون ، 2002) ، السويد (سترومبيرج وآخرون ، 2001) ، هولندا (كيسيل وآخرون ، 2002) وغيرها المناطق. Oospores قادرة على البقاء على قيد الحياة لأكثر من عامين في التربة في حالة قابلة للحياة (Bødker وآخرون ، 2) وتسبب عدوى النباتات بعد الشتاء (Ulanova et al. ، 2006 ؛ Lehtinen et al. ، 2010).
في وقت سابق تبين أن أوراق النباتات من طبقات مختلفة من شجيرة البطاطس لها اختلافات في مقاومة اللفحة المتأخرة ؛ يزداد من الأوراق السفلية إلى الأوراق العليا. لا يعتمد هذا الاتجاه على عمر الورقة أو عمر النبات أو صنف البطاطس (Vesper et al. ، 2003). في الوقت نفسه ، لم نتمكن من العثور على بيانات حول الاختلافات في شدة تكوين البويضات في أوراق طبقات مختلفة من شجيرة البطاطس في الأدبيات. ومع ذلك ، في حالة وجود مثل هذه الاختلافات ، فيجب أخذها في الاعتبار عند أخذ عينات الأوراق لتحليل تكوين البويضات وعند تفسير النتائج التي حصل عليها مؤلفون آخرون. كان الهدف من هذا العمل دراسة تكوين البويضات في الأوراق المنفصلة لطبقات مختلفة من نبات البطاطس ، الموضوعة في نفس الظروف في غرف رطبة.
المواد والأساليب
استخدمنا 5 عزلات P. infestans تم عزل أنواع مختلفة من التزاوج من العينات المصابة التي تم إحضارها من مناطق موسكو وريازان ولينينغراد. من بين هؤلاء ، تم اختيار 3 أزواج من السلالات من أنواع التزاوج المختلفة ، مما أعطى الكثير من البويضات عند اختبارها في وسط أجار الشوفان.
للاختبار ، استخدمنا نباتات البطاطس الخالية من الفيروسات من الأصناف التالية المزروعة في دفيئة (في ركيزة من الخث): ساندرين المبكر ، زوراتشكا ، أولادار ، أوزوريس ، منتصف بداية إلينسكي ، منتصف الموسم يانكا.
تم اختيار أوراق بسيطة من مستويات مختلفة من نبات البطاطس للتحليل. تم اختيار ثلاث أوراق من المستوى السفلي (4 أوراق مركبة سفلية) ، وثلاثة من الأعلى (3-4 أوراق مركبة في الأعلى) ، وثلاث أوراق من وسط الأدغال. تم وزن الأوراق البسيطة ، وتصويرها على ورق منسق (لحساب الحجم والمساحة) ، ثم وضع رأسًا على عقب على سطح الماء المعقم ، وصب 25 مل في أطباق بتري. ثم أصيبت كل ورقة بقطرة واحدة من معلق مختلط لعزلات zoosporangia A1 و A2 من نوع التزاوج. بالنسبة لثلاثة أوراق تم جمعها من كل مستوى ، تم استخدام لقاح من ثلاثة أزواج مختلفة من العزلات. أصيبت ورقة واحدة بمزيج لقاح من زوج واحد من العزلات.
لتحضير معلق من zoosporangia ، نمت عزلات من أنواع التزاوج المختلفة على وسط شوفان أجار لمدة 7 أيام ، وبعد ذلك تم غسل zoosporangia بالماء المقطر المعقم. كان تركيز اللقاح 5-7 من الأبواغ الحيوانية في مجال رؤية المجهر بتكبير 80x. كل ورقة مصابة بقطرة واحدة من معلق مختلط لعزلات zoosporangia من النوع A1 و A2 التزاوج.
في جميع التجارب ، تم استخدام 3 أوراق بطاطس لكل متغير. بعد الحضانة لمدة 20 يومًا عند 18 درجة مئوية ، تم تجانس كل ورقة في ملاط مع 2 مل من الماء المقطر. من المعلق الناتج ، تم أخذ 3 عينات ، منها تم تحضير مستحضرات الفحص المجهري.
في كل متغير ، تم فحص 180 حقلاً بصريًا ، وبعد ذلك تم فحص عدد الأبواغ لكل 1 مم2 سطح الورقة. تم حساب متوسط نتائج العد لكل متغير.
لحساب فاصل الثقة (μ) لمستوى أهمية 0,05 ، تم استخدام الصيغة التالية
حيث s هو الانحراف المعياري ، n هو عدد القياسات ، t هو ثابت اختبار t لمستوى أهمية 0,05. تم إجراء جميع الحسابات في Excel (حزمة Microsoft Office).
نتائج ومناقشة
أظهر تلقيح الأوراق التي تم جمعها من طبقات مختلفة من شجيرة البطاطس ووضعها في نفس الظروف في غرف رطبة اختلافات في شدة تكوين البويضات. في جميع الأصناف المدروسة ، تم تكوين أكبر عدد من الأبواغ أثناء تلقيح الأوراق التي تم جمعها من الطبقات الدنيا والمتوسطة من الأدغال. لا توجد فروق ذات دلالة إحصائية في تكوين البويضات في الأوراق السفلى والوسطى.
تم تشكيل أقل عدد من الأبواغ في أوراق الطبقة العليا (الشكل 1).
في أوراق الطبقات الدنيا والمتوسطة ، تم تشكيل الحد الأقصى لعدد الأبواغ في أصناف Sandrin و Ilyinsky و Zorachka و Uladar و Osiris. تم تشكيلها بشكل أقل كثافة إلى حد ما في أوراق صنف Yanka. لوحظ الحد الأقصى لعدد الأبواغ الموجودة في أوراق الطبقة العليا في أوراق صنف أولادار ، ثم ذهب زوراشكا ، وأوزوريس ، ويانكا ، وإيلينسكي ، وساندرين بترتيب تنازلي ، ولكن لم تكن جميع الفروق ذات دلالة إحصائية.
الشكل: 1. تكوين الأبواغ في أوراق طبقات مختلفة من شجيرة البطاطس. الأوراق السفلية هي أوراق المستويات السفلية الثلاثة للأدغال ، والأوراق العلوية تتكون من 3-4 أوراق معقدة من أعلى النبات ، والأوراق الوسطى من منتصف الأدغال.
تظهر أشرطة الخطأ فاصل الثقة لمستوى أهمية 0,05.
في هذا المجال ، تساهم الظروف المناخية المناخية أيضًا في تكوين الأبواغ في الأوراق السفلية والوسطى للأدغال: رطوبة أعلى ، وتقليل التشمس الشمسي ، وتقلبات درجات الحرارة اليومية (هاريسون ، 1992) يؤدي الرش العلوي إلى تقليل مبيدات الآفات في قاع ووسط الأدغال. لتقليل تكوين البويضات ، يجب استخدام التقنيات التي تسمح بإيصال مبيدات الفطريات بنجاح إلى الأجزاء السفلية والمتوسطة من الأدغال. يمكن الحصول على نتائج جيدة باستخدام رشاشات الهواء المضطرب ومبيدات الفطريات الجهازية التي يمكن أن تنتشر إلى الأجزاء غير المعالجة من الأدغال.
تم دعم هذا العمل من قبل مؤسسة العلوم الروسية (رقم المشروع 14-50-00029).
نُشر المقال في مجلة "حماية البطاطس" (العدد 2 ، 2015).